虽然一般认为DNA探针敏感度不如cRNA探针,但在病毒的检测等领域中DNA探针仍得到广泛的应用。 在原位杂交细胞化学的操作步骤方面与cRNA探针基本相同,所不同的是:(1)杂交时需先在高温80~95℃短时处理,使DNA探针及细胞内靶DNA变性,解离成单链,迅置于冰上冷却。然后置于37℃~42℃杂交过夜。(2)RNA酶的溶液的冲洗不能减低背景,因此,在操作步骤...
...后,浸泡于稀释后的 辣根 过氧化酶— 葡萄 球菌A蛋白液洗涤后将该膜放入新配制的底物显色液中,震荡,显色,清洗,照相。 1.2 试剂盒的临床应用 研究对象:①病人:诊断按胃镜及活检病理确定。同期均检测Hp抗体。第一阶段用全菌抗原(抗Hp抗体)。男741例,女459例,年龄为18岁~77岁(42岁±10岁)。第二阶段用商品化试剂盒Hp尿素酶抗原(抗Hp-u抗体...
...定与空肠变曲菌(C.jejuni)、结肠变曲菌(C.coli)及海鸥变曲菌(C.laris)无交叉反应。 2 结果 2.1 HpU抗原纯化 应用SephadesG200柱,从Hp超声破碎物离心上清液中,一次性提纯了Hp尿素酶抗原。SDS—PAGE分析结果表明,所提取的Hp尿素酶抗原中仅含有66KD及30KD两种蛋白成分,与Hp尿素酶蛋白两种亚基的大小完全相同...
(1)将整封染色体铺片放置于金网上,在70%的酒精蒸汽固定4~15h,空气干燥。 (2)以强碱使DNA变性,将金网置于2×SSC内(应用0.1n NaOH调整至pH12),室温,2min。 (3) 脱水 ,以70%和95%酒精各冲洗3次,空气干燥。 (4)杂交,金网覆于平面 玻璃 皿( Petri dish)内的杂交液滴上,每滴约10~15μl,将此小碟置于...
...后,浸泡于稀释后的 辣根 过氧化酶— 葡萄 球菌A蛋白液洗涤后将该膜放入新配制的底物显色液中,震荡,显色,清洗,照相。 1.2 试剂盒的临床应用 研究对象:①病人:诊断按胃镜及活检病理确定。同期均检测Hp抗体。第一阶段用全菌抗原(抗Hp抗体)。男741例,女459例,年龄为18岁~77岁(42岁±10岁)。第二阶段用商品化试剂盒Hp尿素酶抗原(抗Hp-u抗体...
...被消耗,又不断地得到化生和补充。这中间,气、血、津液布到全身,是通过经络来实现的,而经络本身也需要气、血、津液的营养。由此可见,气、血、津液与脏腑、经络等组织器官之间有着相互依存、相互作用的密切关系。 此外,“精”也是人体生命活动的物质基础,有广义与狭义之分。广义之“精”;狭义之精,即指藏之于肾,与生长发育和生殖有关的精微物质。这已在本章第一节“肾”中论述,...
(一)光敏生物素标记cRNA探针的应用 以线性质粒DNA为模板合成未加标记物的cRNA探针,使其最终浓度为0.5~1.0μg/μl(500~1000ng/μl),再与等体积的光敏生物素(1μg/μl)混合。在150瓦卤素灯下,距离光源20cm处照射30min。用仲丁醇抽提游离生物素,再用丁醇沉淀回收光敏生物素cRNA探针,将其溶于适量的灭菌双蒸水,用紫外分光...
话言贤臣看毕,开言便问说:“请问仙翁,何缘到此?” 那道者听问,口呼:“抚院,须要听真,道人家住蓬莱岛内,寿与天齐,长生不老,从来不染红尘。因清官似水,感动神仙到此,吾乃氤氲使者,管理婚姻,清官遇此疑难之事,冯春告状,图赖封真,打死秋葵,凶犯尚没下落,抚院不知谁是凶手,故此道人临凡,指点迷津,要知犯人名姓,新诗一首记清,念的是:‘木土相逢散绿荫,野猿无犬人园...
...定与空肠变曲菌(C.jejuni)、结肠变曲菌(C.coli)及海鸥变曲菌(C.laris)无交叉反应。 2 结果 2.1 HpU抗原纯化 应用SephadesG200柱,从Hp超声破碎物离心上清液中,一次性提纯了Hp尿素酶抗原。SDS—PAGE分析结果表明,所提取的Hp尿素酶抗原中仅含有66KD及30KD两种蛋白成分,与Hp尿素酶蛋白两种亚基的大小完全相同...
(一)肾小球疾病发病机制的研究 应用免疫荧光或免疫酶标技术,可对肾小球内免疫复合物沉积的机制、补体系统的激活途径、凝血机制的启动等进行研究,兹分述如下: 1.免疫复合物的形成及沉积的机制 有下列三种情况: (1)抗原及抗体在血液循环中结合形成循环免疫复合物沉积于肾小球:常见于毛细血管内增生性肾小球肾炎,抗原(如链球菌、 葡萄 球菌等)侵入人体后,免疫系统产生...
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